Clonación por dilución

A clonación por dilución ou clonación por dilución limitante^[1]^[2] é un procedemento para obter unha poboación de células monoclonal a partir dunha masa de células inicialmente policlonal. Isto conséguese realizando unha serie de dilucións cada vez maiores do cultivo celular policlonal inicial. Faise unha suspensión das células parentais. Fanse despois as dilucións apropiadas, dependendo do númerode células e da poboación inicial, así como da viabilidade e características das células que van ser clonadas. Despois de realizadas as dilucións finais, colócanse nunha placa alicuotas da suspensión^[1] ou vértense en pociños^[2] e son incubadas. Se todo funcionou correctamente, vaise orixinar unha colonia de células monoclonais. Entre as aplicacións deste procedemento están a clonación de parasitos,^[3] células T inmunitarias,^[4] células transxénicas^[5] e macrófagos.^[6]

Notas

↑ ^1,0 ^1,1 Freshney, R. Ian (2010). Culture of animal cells : a manual of basic technique and specialized applications (6th ed.). Hoboken, N.J.: Wiley-Blackwell. pp. 208–211. ISBN 9780470528129.
↑ ^2,0 ^2,1 Davis, edited by John M (2011). Animal cell culture. Oxford: Wiley-Blackwell. pp. 239–240. ISBN 978047066658-6.
↑ Butterworth, Alice S; Robertson, Alan J; Ho, Mei-Fong; Gatton, Michelle L; McCarthy, James S; Trenholme, Katharine R (2011). "An improved method for undertaking limiting dilution assays for in vitro cloning of Plasmodium falciparum parasites". Malaria Journal 10 (1): 95. ISSN 1475-2875. doi:10.1186/1475-2875-10-95.
↑ Rout, Namita; Else, James G.; Yue, Simon; Connole, Michelle; Exley, Mark A.; Kaur, Amitinder (2 July 2010). "Heterogeneity in phenotype and function of CD8+ and CD4/CD8 double-negative Natural Killer T cell subsets in sooty mangabeys". Journal of Medical Primatology 39 (4): 224–234. doi:10.1111/j.1600-0684.2010.00431.x.
↑ Lilienfeld, Benjamin G.; Crew, Mark D.; Forte, Pietro; Baumann, Bettina C.; Seebach, Jörg D. (1 March 2007). "Transgenic expression of HLA-E single chain trimer protects porcine endothelial cells against human natural killer cell-mediated cytotoxicity". Xenotransplantation 14 (2): 126–134. doi:10.1111/j.1399-3089.2007.00378.x.
↑ Seki, Yoshihiro; Suzuki, Satoshi O.; Masui, Kenta; Harada, Shiori; Nakamura, Seiji; Kanba, Shigenobu; Iwaki, Toru (1 June 2011). "A simple and high-yield method for preparation of rat microglial cultures utilizing Aclar plastic film". Neuropathology 31 (3): 215–222. doi:10.1111/j.1440-1789.2010.01163.x.

Véxase tamén

Ligazóns externas

Robert Staszewski "Cloning by Limiting Dilution: an improved estimate that an interesting culture is monoclonal" [1]
John A. Ryan "Cell Cloning by Serial Dilution in 96 Well Plates".
Vilma Maldonado,Jorge Meléndez-Zajgla "A modified method for cloning adherent mammalian cells".
"Cloning by Limiting Dilution".^{[Ligazón morta]}
"Cloning by limiting dilution".
Nanci Donacki "Cloning by Limiting Dilution of Hybridoma".

Este artigo sobre bioloxía é, polo de agora, só un bosquexo. Traballa nel para axudar a contribuír a que a Galipedia mellore e medre.
Existen igualmente outros artigos relacionados con este tema nos que tamén podes contribuír.

[Fresh-1] 1,0 ^1,1 Freshney, R. Ian (2010). Culture of animal cells : a manual of basic technique and specialized applications (6th ed.). Hoboken, N.J.: Wiley-Blackwell. pp. 208–211. ISBN 9780470528129.

[Dav-2] 2,0 ^2,1 Davis, edited by John M (2011). Animal cell culture. Oxford: Wiley-Blackwell. pp. 239–240. ISBN 978047066658-6.

[ButterworthRobertson2011-3] Butterworth, Alice S; Robertson, Alan J; Ho, Mei-Fong; Gatton, Michelle L; McCarthy, James S; Trenholme, Katharine R (2011). "An improved method for undertaking limiting dilution assays for in vitro cloning of Plasmodium falciparum parasites". Malaria Journal 10 (1): 95. ISSN 1475-2875. doi:10.1186/1475-2875-10-95.

[4] Rout, Namita; Else, James G.; Yue, Simon; Connole, Michelle; Exley, Mark A.; Kaur, Amitinder (2 July 2010). "Heterogeneity in phenotype and function of CD8+ and CD4/CD8 double-negative Natural Killer T cell subsets in sooty mangabeys". Journal of Medical Primatology 39 (4): 224–234. doi:10.1111/j.1600-0684.2010.00431.x.

[5] Lilienfeld, Benjamin G.; Crew, Mark D.; Forte, Pietro; Baumann, Bettina C.; Seebach, Jörg D. (1 March 2007). "Transgenic expression of HLA-E single chain trimer protects porcine endothelial cells against human natural killer cell-mediated cytotoxicity". Xenotransplantation 14 (2): 126–134. doi:10.1111/j.1399-3089.2007.00378.x.

[6] Seki, Yoshihiro; Suzuki, Satoshi O.; Masui, Kenta; Harada, Shiori; Nakamura, Seiji; Kanba, Shigenobu; Iwaki, Toru (1 June 2011). "A simple and high-yield method for preparation of rat microglial cultures utilizing Aclar plastic film". Neuropathology 31 (3): 215–222. doi:10.1111/j.1440-1789.2010.01163.x.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]